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丽春红染色液可以用于PVDF膜、硝酸纤维素膜(NC膜)上蛋白的检测。丽春红带负电荷，可以与带正电荷的氨基酸残基结合，同时丽春红也可以与蛋白的非极性区相结合，从而形成红色的条带。

• 由于尼龙膜带正电荷能与带负电荷的丽春红结合，不易脱色，丽春红染色液不适用于尼龙膜上的蛋白的检测。
  
• 丽春红染色液对印迹膜上蛋白检测灵敏度如下：NC膜可以检测50～100ng蛋白，PVDF膜可以检测250～500ng。丽春红检测PVDF膜灵敏度不高。
  
• 丽春红对蛋白的染色是可逆的，染色后可以用TBST溶液洗去。
  
• 本染色液为即用型工作液，可以直接使用，不用稀释。

• 电泳结束后，将膜用超纯水震荡漂洗3次，每次2分钟，彻底去除膜表面的任何残余物质，这些物质可能会影响丽春红和蛋白的结合。
  
• 将膜浸泡到适量丽春红染色液中，摇动5～15分钟。此时膜背景为红色，条带不可见或不明显。
  
• 用蒸馏水漂洗膜1～2次，每次3～5分钟，直到条带清晰可见为止。
  
• 观察保存染色结果。
  
• 1×TBST漂洗膜5分钟，重复漂洗2～3次，直至膜上看不到红色条带。
  
• 进行后续封闭步骤。